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荧光定量PCR 若何做到定量呢?

2015-11-28手艺材料

来历:转载收集 作者: dzwd

我要做RT-qPCR,第一步是提取动物内的总RNA,这里呈现个题目,参考步骤里边写的是取0.1g叶片,这个0.1怎样取啊?:rol:研磨的时辰选用的是液氮,研钵上粘的满哪都是:shuai:,我纠结了,有做过的吗?你们用的甚么方式啊!望不吝见教!!

这个量没须要那末切确啦,差未几就好了,归正还要有内参的
 
本来如斯!
 

做反转录的时辰,差别的样品利用一样量的RNA便能够啦。而后做PCR时利用一样量的cDNA做模板,Zui后,另有内参来改正模板量差别。


我是这么懂得的,你看对错误哈。我要测定的是RNA抒发量,起首得是取不异量的动物叶片,而后看下RNA量的几多,感受如许才成心义啊!我先去细心看看方式步骤吧,本身懂得有误?
 
 
是如许的,每步都Zui好保障一样量,取叶片刻固然也是。不过就算完整一样的样品分红两份来提,获得的RNA的量也会有所差别的。
 
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